Tampón de dilución

50 mM Tris-HCl (pH 7.5), que contiene 5 mM cloruro de calcio and 50% (v/v) glicerol.

Características

• Activa en una amplia gama de productos de reacción.
• Actividad específica: 40 U/mg de proteína.
• Forma: Contiene 100 mg de proteinasa K, polvo liofilizado.

Aplicaciones

• Aislamiento de ADN genómico de células y tejidos cultivados.
• Eliminación de ADNasas y ARNasas al aislar ADN y ARN de tejidos o líneas celulares.
• Determinación de la localización enzimática.
• Mejora de la eficacia de la clonación de productos de PCR

Almacenamiento

Para un almacenamiento prolongado, almacene la proteinasa K liofilizada a 4 ºC y el tampón de dilución a -20 ºC. Las soluciones disueltas deben almacenarse a -20 ºC.

Nota

Actividad óptima de 50-55ºC.

La desnaturalización rápida de la enzima ocurre a temperaturas superiores a 65ºC.

La concentración de trabajo recomendada para la proteinasa K es de 0,05 a 1 mg/ml. La actividad de la enzima se estimula con SDS al 0,2-1% o con urea 1-4 M.

El Ca2+ protege la proteinasa K contra la autolisis, aumenta la estabilidad térmica y tiene una función reguladora para el sitio de unión al sustrato de la proteinasa K.

Estable en un amplio rango de pH: 4,0-12,5 ; pH óptimo 7,5-8,0.